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植物組織培養(yǎng)的六大步驟

  現在各大農業(yè)行業(yè)或者農業(yè)實驗室對于植物組織培養(yǎng)越來越重視了,下面為大家介紹一下簡單的植物組織培養(yǎng)的過程。
  
  什么是植物組織?
  
  植物的組織培養(yǎng)是根據植物細胞具有全能性這個理論,近幾十年來發(fā)展起來的一項無性繁殖的新技術。植物的組織培養(yǎng)廣義又叫離體培養(yǎng),指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質體等,通過無菌操作,在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。狹義是指組培指用植物各部分組織,如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養(yǎng)獲得再生植株,也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產生愈傷組織的培養(yǎng),愈傷組織再經過再分化形成再生植物。
  
  一個完整的植物組織培養(yǎng)過程一般包括以下幾個步驟:
  
  (1)準備階段
  
  查閱相關文獻,根據已成功培養(yǎng)的相近植物資料,結合實際制訂出切實可行的培養(yǎng)方案。然后根據實驗方案配制適當的化學消毒劑以及不同培養(yǎng)階段所需的培養(yǎng)基,并經高壓滅菌或過濾除菌后備用。
  
  (2)外植體選擇與消毒
  
  選擇合適的部位作為外植體,采回后經過適當的預處理,然后進行消毒處理。將消毒后的外植體在無菌條件下切割成一定大小的小塊,或剝離出莖尖,挑出花藥,接種到初代培養(yǎng)基上。(3)初代培養(yǎng)
  
  接種后的材料置于培養(yǎng)室或光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),促使外植體中已分化的細胞脫分化形成愈傷組織,或頂芽、腋芽直接萌發(fā)形成芽。然后將愈傷組織轉移到分化培養(yǎng)基分化成不同的器官原基或形成胚狀體,最后發(fā)育形成再生植株。
  
  (4)繼代培養(yǎng)
  
  分化形成的芽、原球莖數量有限,采用適當的繼代培養(yǎng)基經多次切割轉接。當芽苗繁殖到一定數量后,再將一部分用于壯苗生根,另一部分保存或繼續(xù)擴繁。進行脫毒苗培養(yǎng)的需提前進行病毒檢測。
  
  (5)生根培養(yǎng)
  
  剛形成的芽苗往往比較弱小,多數無根,此時可降低細胞分裂素濃度或不加,提高生長素濃度,促進小苗生根,提高其健壯度。
  
  (6)煉苗移栽
  
  選擇生長健壯的生根苗進行室外煉苗,待苗適應外部環(huán)境后,再移栽到疏松透氣的基質中,注意保溫、保濕、遮蔭,防止病蟲危害。當組培苗完全成活并生長一定大小后,即可移向大田用于生產。
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